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本试剂盒适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100bp～30kb的DNA片段，回收效率可达70%。该试剂盒中的纳米磁珠能够特异性吸附核酸分子，去除其他杂质，得到高质量的DNA回收产物。所得到的DNA可直接用干酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。

• 适用范围广，回收效率高，对于100bp～30kb之间的DNA片段回收效率在70%以上，尤其对于长片段DNA片段的回收，磁珠法比柱式法的回收效率高出20%左右。
  
• 操作简单快速，整个回收过程仅需30分钟左右。
  
• 无需离心，实现DNA回收的高通量化和自动化。

• Buffer MB2中含有刺激性的化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗
  
• Buffer MB2在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请干37℃溶解沉淀，待冷却至室温后使用。
  
• 按瓶身标签说明在Buffer MGW中加入相应量的无水乙醇（乙醇终浓度为80%)，混匀后在瓶身做好标记。密封于室温保存。
  
• 请提前将水浴锅调至65℃备用。

• 通过琼脂糖凝胶电泳尽可能将目的DNA片段与其它片段分开，用干净的手术刀片将含目的DNA片段的琼脂糖凝胶块切下，放入1.5mL离心管中，称重。
  注意：
  • 若胶块重量超过300mg或胶浓度大于1.5%，请将切下的目的胶块放入2mL的离心管中。
    
  • 尽可能多地去掉不含目标DNA的琼脂糖。
    
  • 若胶块体积太大，可先将胶块切成小块。
    
  • 切胶过程尽可能快，减少DNA在紫外线中的暴露时间以降低对DNA的损伤。
• 根据胶块的重量，按每100mg琼脂糖胶块（如胶块不足100mg则用水补充至100mg)加入200μL Buffer MB2。
  
• 将含有胶块的离心管置于65℃水浴5～10min，间或混匀，直至胶块完全溶化。
  注意：胶块完全溶化即可，过长时间的处理可能导致DNA损伤。
  
• 取出离心管，若凝胶浓度≤1.5%，加入与Buffer MB2等体积的Buffer MGB和25μL MagPure Beads；若凝胶浓度＞1.5%，分别加入与Buffer MB2等体积无菌ddH₂O和Buffer MGB，再加入25μL MagPure Beads，吸打混匀，室温静置2min。
  注意：
  • 加MagPure Beads之前，请将MagPure Beads充分混匀。
    
  • 请务必将MagPure Beads加至液面以下，尽量将枪头上残留MagPure Beads吸打干净。
    
  • 处理多个样品时，可先将Buffer MGB与MagPure Beads按8:1的体积比混匀，然后向每个离心管中加入225μL上述混合液。
• 将离心管置于磁力架上3～5min，待MagPure Beads完全吸至管壁上之后，吸弃上清，从磁力架上取出离心管。
  注意：
  • 吸弃上清前，若管口粘有少量MagPure Beads，请用上清液将其洗至离心管内，以确保所有MagPure Beads吸附至管壁上。
    
  • 当所有MagPure Beads完全吸至管壁时，上清液无色澄清，若5min之后上清液是淡黄色，请适当延长吸附时间，直到上清液无色澄清。
    
  • 吸弃上清时请勿吸入MagPure Beads，尽量吸净上清。
    
  • 从磁力架上取出离心管后，若有少量上清，请将离心管置于磁力架上，再次吸取上清。
• 加入900μL Buffer MGW，吸打或者点振混匀，然后将离心管置于磁力架上1min，待MagPure Beads完全吸至管壁上之后，吸弃上清，从磁力架上取出离心管。
  注意：
  • Buffer MGW首次使用前请检查是否已加入正确量的无水乙醇。
    
  • 吸弃上清前，若管口粘有少量MagPure Beads，请用上清液将其洗至离心管内，以确保所有MagPure Beads吸附至管壁上。
    
  • 吸弃上清时，请勿吸入MagPure Beads，尽量吸净上清。
• 重复步骤6一次，室温开盖干燥15～20min或者55℃恒温箱中开盖干燥5～7min至管内无液体残留。
  注意：
  • 干燥前，请尽量吸净管内的液体。
    
  • 干燥前，若出现液体挂壁现象，可将离心管短暂离心之后，再将其置于磁力架上，待所有MagPure Beads完全吸至管壁之后再吸净管内的液体。
• 加入50μL TE Buffer (pH8.0)，65℃水浴5～10min，间或混匀。
  注意：
  • 请将管壁上所有MagPure Beads悬浮在TE Buffer中。
    
  • 根据实验需要可将TE Buffer用无菌的双蒸水(pH>7.5)代替。
• 取出离心管并置于磁力架上1min，待MagPure Beads完全吸至管壁上之后，小心吸取上清至新的离心管，即获得回收的目的DNA。
  注意：吸取上清前，请确保MagPure Beads完全吸至管壁，请勿吸入MagPure Beads，否则影响产物纯度。

• DNA回收效率较低或者未回收到目的片段
  • 胶块溶解不完全。可适当延长水浴时间，并增加颠倒混匀的频率辅助溶解。
    
  • 胶块体积太大，溶胶困难。可先将胶块切碎，再水浴溶胶。
    
  • Buffer MGW中未加入正确量的无水乙醇。
    
  • 结合不充分。加入Buffer MGB和MagPure Beads之后，请将其充分混匀，并使MagPure Beads处干悬浮状态。
    
  • 操作过程中丢失MagPure Beads。结合及洗涤过程中可能有少量的MagPure Beads粘在离心管管口上，吸弃上清前请用少量的上清液清洗管口，使粘在管口的MagPure Beads也吸附在管壁上。
    
  • 洗脱液不合适。洗脱缓冲液的pH值对洗脱效率有影响，如果使用水进行洗脱，请确保其pH值＞7.5，pH值过低可能导致低洗脱效率。
    
  • 洗脱过程操作不当。洗脱时请将管壁上所有MagPure Beads悬浮在TE Buffer中。
    
  • 洗脱过程忘记水浴。加入TE Buffer之后请65℃水浴5～10min，常温条件下MagPure Beads只能释放少量的DNA，65℃条件下MagPure Beads与DNA的相互作用力减弱，MagPure Beads释放出大量的DNA。
• 回收DNA进行后续酶切反应效率低
  • 洗涤液Buffer MGW有残留。请吸弃上清之后从磁力架上取出离心管，放置2min之后再将离心管置于磁力架上1min，吸净管底的液体。若出现残液挂壁现象，请短暂离心之后将离心管置于磁力架上1min，吸净离心管内的液体。
    
  • MagPure Beads洗涤不充分。向离心管中加入Buffer MGW以后，请充分混匀，使MagPure Beads充分悬浮在Buffer MGW中。
    
  • MagPure Beads没有完全干燥。请将MagPure Beads完全干燥，保证无乙醇残留。
    
  • 最后一步吸取上清时吸入MagPure Beads。请确保所有MagPure Beads吸至管壁上，再吸取上清。如果不小心吸入MagPure Beads，请将上清液放回原管，待MagPure Beads完全吸至管壁之后重新吸取上清。或者将吸取的上清DNA溶液10000rpm离心2min，再取上清。
• 琼脂糖凝胶胶块不溶
  • 琼脂糖质量差。请选用高质量的琼脂糖。
    
  • 含目的片段的胶块在空气中放置时间过长，使胶块失水、干燥。建议切胶后立即进行胶回收，或将胶块保存在4℃或-20℃备用。
    
  • 配制琼脂糖凝胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。应重新配制缓冲液。
• 洗脱液的选择
  • 洗脱液可以根据后续实验的需要来确定。一般情况下，若需要进行测序反应，请用双蒸水洗脱。如果需要长期保存DNA，请用TE Buffer洗脱。